Денис Александрович Тимофеев родился 10 августа 1978 года в г. Дно Псковской области.

Отец: Тимофеев Александр Иванович, 1953 г. р., мать: Тимофеева Галина Владимировна, 1958 г. р., в настоящее время пенсионеры ОАО «РЖД».

В 1993 году окончил школу № 53 г. Дно. После окончания школы в этом же году начал обучение в Дновском профессиональном училище № 10. В 1996 году окончил училище с присвоением квалификации помощник машиниста тепловоза. 

После окончания училища поступил в Петербургский государственный университет путей сообщения на механический факультет. Университет окончил в 2001 году с присвоением квалификации: инженер путей сообщения электромеханик по специальности «Локомотивы». После окончания университета начал трудовую деятельность в локомотивном депо Дно. 

С 2001 по 2006 гг. – инженер технолог локомотивного депо Дно. 

С 2006 по 2007 гг. – начальник отдела качества локомотивного депо Дно. 

С 2007 по 2008 гг. – заместитель начальника службы качества и маркетинга Октябрьской железной дороги.

 С 2008 по 2009 гг. – мастер тележечного цеха локомотивного депо Дно. 

 С 2009 по 2010 гг. – заместитель начальника ремонтного локомотивного депо Дно-Псковское по кадрам и социальным вопросам. 

С 2010 по 2011 гг. – заместитель начальника ремонтного депо Дно-Псковское по ремонту. 

С 2011 по 2014 гг. – старший контролёр подразделения Дно ООО «ТМХ –Сервис». 

С 2014 г. по настоящее время – заместитель начальника эксплуатационного локомотивного депо Дно по планированию и контролю ремонта.

8 сентября 2019 года избран депутатом Собрания депутатов Дновского района по одномандатному избирательному округу № 2, выдвинут партией «ЯБЛОКО».

Женат, двое детей. Жена Екатерина Константиновна Тимофеева, 1980 г. р., бухгалтер сервисного локомотивного депо Дно-Псковское ООО «ЛокоТех-Сервис».

Сыновья: Дмитрий Денисович Тимофеев, 2002 г. р., учащийся МОУ «Средняя школа № 1», Макар Денисович Тимофеев, 2013 г. р.